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BL698A Kit di fluorescenza quantitativa PCR (5X1mL)
Biosharp BL698A Fluorescenza Quantitative PCR Kit (5X1mL) è un reagente specializzato per la PCR in tempo reale utilizzando il metodo di fluorescenza
Dettagli del prodotto

Biosharp BL698A Fluorescente Quantitative PCR Kit (5X1mL)

Introduzione del produttore:

Biosharp BL698A Fluorescente Quantitative PCR Kit (SYBR Green qPCR Mix)

Marca:biosharp

Numero di articolo:BL698A

Specifiche:5X1mL

Questo prodotto è realizzato utilizzandoSYBR Green IMetodo di fluorescenza chimericaReal Time PCRReagenti speciali per avviamento a caldoTaq DNAPolimerasidNTPSYBR Green IPronto all'uso una volta che i reagenti sono pre-miscelati2x Mix, può colpirecDNAEseguire un rilevamento quantitativo rapido e altamente specifico. Questo prodotto è chimicamente modificatoHot Start Taq DNAPolimerasi, in50 ℃Il seguente è inattivo, solo95 ℃In determinate condizioni, l'attività dell'enzima può essere completamente ripristinata solo dopo il riscaldamento, ZRidurre al minimo la produzione di prodotti di amplificazione non specifici e migliorare la quantificazione della fluorescenzaPCRLa precisione della reazione. Il buffer di reazione unico di questo kit può ottenere buoni risultati di amplificazione in un ampio intervallo, sensibilità di rilevamento più elevata e segnale più forte.

Componenti del prodotto:

numero del prodotto

Nome del prodotto

specifiche

1

Mix qPCR verde 2×SYBR

5x1ml

2

Tintura di riferimento 50×ROX

1ml

condizioni di conservazione

Dopo aver ricevuto questo prodotto, si prega di posizionarlo immediatamente-20℃Conservare al buio, valido per un anno28℃Stoccaggio in condizioni6MeseEvitare cicli ripetuti di congelamento-scongelamento.

istruzioni

1,PreparazioneReal-Time PCRSistema di reazione:

1Raccogliere tutti i reagentiMix qPCR verde 2×SYBRROX Reference DyeModelli, primer eRNase-Free ddH2OSciogliere e mescolare accuratamente a temperatura ambienteEvitare di generare bolle.Dopo una breve centrifugazioneposto su ghiaccioPreparare la soluzione di reazione secondo la tabella sottostante.

Fare riferimento alla tabella seguente per preparare il sistema di reazione:

componente

20ulsistema

concentrazione finale

SYBR Green qPCR Mix

10 μl

Primer F (10 μM)*

0,4~0,8 μl

0,2~0,4 uM

Primer R (10 μM)*

0,4~0,8 μl

0,2~0,4 uM

50 x colorante di riferimento ROX**

cDNAmodello

--

RNase-Free ddH2O

a20 μl

* In generale, la concentrazione finale di primer nel sistema di reazione è0,2 uMSi può ottenere un migliore effetto di amplificazione. Quando la prestazione di reazione è scarsa, può essere raggiunta alla concentrazione finale0,2~0,4 uMRegolare la concentrazione del primer all'interno dell'intervallo.

** Z adattabilità di diversi strumenti comuniROX Reference DyeLa concentrazione è indicata nella tabella seguente:

Modello dello strumento

ppm

ABI PRISM 7000/7300/7700/7900HT/StepOne/StepOnePlusclasse

ABI 7500/7500 FastQuantStudio ® 3/5QuantStudio 6/7 FlexViiA 7Stratagene Mx3000P/Mx3005PeMx4000Aspetta.

RocheBio-RadEppendorfAspetta.

Non è necessario aggiungere

2Tubo di reazione coperto o sigillato/PCRPiastra, mescolare delicatamente. Breve centrifugazione per assicurare che tutti i componenti siano in tubo/Il fondo della tavola.

II. EseguireReal-Time PCRReazione

1Propone un metodo in due fasiPCRprocedure di reazione.

Procedura di reazione in due fasi:

Passi

temperatura

Durata

Numero di cicli

Preditività

95℃

5min

1

deformazione

95℃

10sec

40

Raccolta estesa dei dati

60℃

30sec

40

Analisi della curva di fusione

Impostazione secondo la procedura raccomandata dello strumento

QuandoFattori come la bassa quantità di modelli causano scarsa amplificazione, che può essere eseguita utilizzando una procedura in tre passaggiPCRReazione.

Procedura di reazione in tre fasi:

Passi

temperatura

Durata

Numero di cicli

Preditività

95℃

5min

1

deformazione

95℃

10sec

40

Incendio

50-60℃

30sec

40

Raccolta estesa dei dati

72℃

30sec

40

Analisi della curva di fusione

Impostazione secondo la procedura raccomandata dello strumento

2Rilevamento a bordo: mettere il sistema di reazione in fluorescenzaPCREseguire il programma per raccogliere i dati e analizzare i risultati.

Biosharp BL698A Kit di fluorescenza per PCR quantitativa (5X1mL)

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