Sistema di imaging fluorescente GFP/Chl. chiuso FluorCam

FluorCamIl sistema di imaging fluorescente GFP/Chl. chiuso può servire una serie di studi di biologia molecolare e cellulare applicati alle proteine fluorescenti verdi. I sistemi di imaging a fluorescenza chiusi sono dotati di ruote di filtro completamente controllate da software e azionate elettricamente, nonché di una serie di filtri per il rilevamento e l'imaging di GFP, EGFP, wtGFP, YFP, BFP o altre proteine ​​e fluorescenti a banda.

Il sistema di imaging fluorescente GFP/Chl. chiuso FluorCam può essere utilizzato anche per rilevare le variazioni dinamiche e la distribuzione spaziale della fluorescenza di clorofila emessa dalle piante, misurare i processi dell'effetto Kautsky, l'estinzione della fluorescenza e altri processi di fluorescenza istantanea (transienti) e fornire immagini fluorescenti 2D. La configurazione hardware appositamente progettata consente la conversione automatica del sistema in imaging per la rilevazione di proteine fluorescenti, fluorescenti o fluorescenti clorofili. Il sistema è altamente integrato e può essere adattato al buio del campione.

Applicazioni:

• Rilevamento della fluorescenza delle proteine fluorescenti e della fluorescenza

• Trasferimento genetico e tecnologia dei biosensori

• Ricerca sulle piante geneticamente modificate

• Screening di resistenza a diversi genotipi

Studi sulle interazioni pianta-microbica

Studi sulle interazioni pianta-animale

· Proprietà di fotosintesi vegetale e screening dei disturbi metabolici

• Rilevamento della coercizione biologica e non biologica

Studi sulla resistenza alla coercizione o sulla sensibilità delle piante

• Studi sulla disuniformità dei pori

• Ricerca sul caos metabolico

• Valutazione della potenza e della produzione

Caratteristiche:

· Facile da usare, campioni di misura regolabili in altezza, integrato speciale box di adattamento scuro per facilitare l'adattamento scuro della pianta da misurare, gestione, ecc.

CCD ad alta risoluzione con risoluzione fino a 1392 x 1040 pixel per la cattura rapida e precisa della fluorescenza clorofilica e del GFP

• Possibilità di eseguire misurazioni di imaging automatiche ripetute, impostazione di un programma sperimentale (Protocolli) di misurazione di imaging automatica ciclica, i dati di misurazione di imaging vengono automaticamente memorizzati nel computer secondo la data oraria (con timbro orario)

• Con vari protocolli sperimentali generici, come l'effetto di induzione di Kautsky e l'analisi di estinzione fluorescente, misura oltre 50 parametri analitici

Modulo di imaging a colori TetraCam opzionale con un'area massima di imaging di 20 x 25 cm per l'analisi della morfologia delle foglie o delle piante

Tipico campione:

• Foglie, steli, semi, radici, piante intere

• Tessuto ferito, piccole piantine in un piatto di Petri

• Frutti e fiori

• Batteri blu, alghe verdi, batteri

• Animali geneticamente modificati

Parametri tecnici:

• Parametri di misurazione: Fo, Fo’, Fs, Fm, Fm’, Fp, FtDn, FtLn, Fv, Fv'/ Fm'，Fv/ Fm ,Fv',Ft,ΦPSII,NPQ_Dn, NPQ_Ln, Qp_Dn, Qp_Ln, qN, qP，QY, QY_Ln,Rfd, ETR Più di 50 parametri di fluorescenza di clorofila, ognuno dei quali può visualizzare immagini a colori fluorescenti 2D

Protocollo completo per la modifica del programma di misurazione automatica

a) Fv / Fm: i parametri di misura includono Fo, Fm, Fv, QY, ecc.

b) Effetto indotto da Kautsky: Fo, Fp, Fv, Ft_Lss, QY, Rfd e altri parametri di fluorescenza

c) Analisi di estinzione fluorescente: Fo, Fm, Fp, Fs, Fv, QY, ΦII, NPQ, Qp, Rfd, qL e altri più di 50 parametri

d) Curva di risposta luminosa LC: Fo, Fm, QY, QY_Ln, ETR e altri parametri di fluorescenza

e) Assorbimento PAR con NDVI (opzionale)

f) A Dinamica dell'ossidazione (opzionale)

g) misurazioni di imaging a fluorescenza statica come GFP

h) Analisi dinamica fluorescente rapida OJIP (opzionale): Mo (inclinazione iniziale della curva OJIP), area fissa OJIP, Sm (misura dell'energia necessaria per chiudere tutti i centri di reazione ottica), QY, PI e altri 26 parametri

Sensore CCD TOMI-2 ad alta risoluzione

a) Scansione lineare CCD

b) Risoluzione massima dell'immagine: 1360 x 1024 pixel

c) Risoluzione temporale: fino a 20 fotogrammi al secondo alla massima risoluzione dell'immagine

Risoluzione di conversione A/D: 16 bit (65.536 gradi di grigio)

e) Dimensioni dell'immagine: 6,45 μm x 6,45 μm

f) modalità di funzionamento: 1) modalità video dinamica per la misurazione dei parametri di fluorescenza della clorofila; 2) Modalità istantanea per la misurazione di proteine fluorescenti e coloranti fluorescenti come GFP

g) Modalità di comunicazione: Gigabit Ethernet

• Scheda di luce: 4 schede di luce a LED ad alta intensità, ciascuna scheda di luce è costituita da un array di LED 8 x 9, con la stessa area effettiva della scheda di luce e l'area di immagine di 13 x 13 cm

• Luce di misura: luce rossa di 617 nm di serie, opzionale in altre bande, durata regolabile da 10 µs a 100 µs

• Luce fotochimica bicolore: 2 luce rossa (617nm) + 2 luce blu (470nm), intensità luminosa massima di Actinic1 300 µmol (fotoni) / m².s, intensità luminosa massima di Actinic2 2000 µmol (fotoni) / m².s; L'ottica fotochimica massima può essere aggiornata a 3000 µmol (fotoni) / m².s

• Flash saturato: intensità luminosa massima di 4000 µmol (fotoni) / m².s, aggiornabile a 6000 µmol (fotoni) / m².s

• Dimensioni dell'immagine: 13 x 13 cm, per l'analisi dell'immagine di foglie vegetali, tessuti vegetali, alghe, muschi, coperture, piante intere o più piante, piatti a 96 fori, piatti a 384 fori ecc.

• Modulo di misurazione del GFP: ruota a 7 bit e filtro dedicato per la misurazione del GFP (proteina fluorescente verde)

• Modulo di misura dell'assorbimento PAR (opzionale): Far Red 740nm (FAR), pannello LED bicolore 660nm e filtro dedicato per misurare l'assorbimento PAR e NDVI

• QA nell'analisi di imaging ossidativa (opzionale): misurazioni di analisi di fluorescenza STF con una potenza di luce STF fino a 120.000 µmol (fotoni) / m².s in 100 µs

• Modulo di dinamica fluorescente rapida OJIP (opzionale): risoluzione temporale fino a 1 µs, misurazione e analisi della curva OJIP con più di una dozzina di parametri correlati tra cui: Fo, Fj, Fi, P o Fm, Vj, Vi, Mo, Area, Fix Area, Sm, Ss, N Phi--_Po, Psi_o, Phi_Eo, Phi_Do, Phi_pav, ABS/RC (flusso quantistico di assorbimento della luce nel centro di reazione unitario), TRo/RC (flusso quantistico di cattura iniziale della luce nel centro di reazione unitario), ETo/RC (flusso quantistico di trasmissione iniziale degli elettroni nel centro di reazione unitario), DIo/RC (dispersione di energia nel centro di reazione unitario), ABS/CS (flusso quantistico di assorbimento della luce nella sezione del campione unitario), TRo/CSo, RC/CSx (densità del centro di reazione), PIABS (indice di "prestazione" o indice di sopravvivenza basato sul flusso quantistico di assorbimento della luce), PIcs (indice di "prestazione" o indice di sopravvivenza basato sulla sezione)

• Pannello LED UV (opzionale): 365nm o 385nm, 1) misurazione della fluorescenza multicolore (vedi FluorCam Multispectral Fluorescence Imaging System per dettagli); 2) misurazione di wtGFP (proteina fluorescente verde di tipo selvatico), DAPI (4',6-dimethyl-2-phenylpiperine, un colorante fluorescente)

• Piastra di luce a LED blu (opzionale): 470 nm, 1) misura EGFP (proteina fluorescente verde potenziata); 2) Per lo studio della funzione del poro

• Piastra LED verde (opzionale): 530 nm, misura YFP (proteina fluorescente gialla)

* Per misurare proteine fluorescenti o coloranti fluorescenti come wtGFP, DAPI, EGFP, YFP è necessario anche un filtro

• Funzionalità del software di analisi dell'immagine fluorescente FluorCam: menù funzionali come Live (test in realtà), Protocolli (selezione personalizzata del programma sperimentale), Pre-processing (pre-elaborazione dell'immagine), Result (risultato dell'analisi dell'immagine)

• Protocolli personalizzati dal cliente: può impostare il tempo (ad es. durata della luce di misura, durata della luce fotochimica, tempo di misura, ecc.), intensità della luce (ad es. intensità della luce fotochimica di qualità diversa, intensità del lampo saturo, modulazione della luce di misura, ecc.), con linguaggio e script di programma sperimentale dedicati, l'utente può anche creare nuovi programmi sperimentali liberamente utilizzando i modelli di programma guidato nel menu Protocollo

• Funzione di analisi automatica delle misurazioni: può essere impostato un protocollo per la misurazione automatica dell'immagine ciclica senza sorveglianza, il numero di ripetizioni e l'intervallo di tempo personalizzati dal cliente, i dati di misurazione dell'immagine vengono memorizzati automaticamente nel computer secondo la data oraria (con timbro orario)

  Modalità snapshot: grazie alla modalità di imaging snapshot, è possibile regolare liberamente l'intensità della luce, il tempo dell'otturatore e la sensibilità per ottenere immagini fluorescenti a stato stabile e istantanee dei campioni di pianta in modo chiaro e in evidenza

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• Pre-elaborazione dell'immagine: il software di programmazione riconosce automaticamente più campioni di pianta o più aree o seleziona manualmente la regione di interesse (ROI). La forma della selezione manuale può essere quadrata, circolare, poligonale o settoriale. Il software misura e analizza automaticamente le curve dinamiche fluorescenti e i parametri corrispondenti per ciascun campione e per l'area selezionata, con un numero illimitato di campioni o aree (>1000)

• Modalità di analisi dei dati: con la modalità "rimedia del calcolo del segnale" (media aritmetica) e la modalità "rimedia del segnale", selezionare la modalità "rimedia del calcolo del segnale" in caso di rapporto segnale-rumore elevato, selezionare la modalità "rimedia del segnale" in caso di rapporto segnale-rumore basso per filtrare gli errori causati dal rumore

• Risultati di uscita: grafico dinamico della fluorescenza ad alta risoluzione temporale, video di variazione dinamica della fluorescenza, file Excel dei parametri della fluorescenza, istogrammi, grafici di imaging parametrici diversi, elenco dei parametri della fluorescenza con diversi ROI, ecc.

• Larghezza di banda del rilevatore CCD: 400-1000 nm

· Sistema di illuminazione: statico o dinamico (sinusoidale)

Risposta spettrale: massima efficienza quantistica (70%) a 540 nm e 50% di riduzione a 400 nm e 650 nm

Rumore di lettura: inferiore a 12eRMS, tipico 10e

Capacità totale della trappola: superiore a 70.000 e (unbinned)

Bios: firmware aggiornabile

• Metodo di comunicazione: Gigabit Ethernet

Dimensioni: 471 mm (L) × 473 mm (D) × 512 mm (H)

Peso: circa 40 kg

Potenza di ingresso: circa 1100 W

Tensione di alimentazione: 90-240 V

Applicazioni tipiche:

L'Istituto di Scienze della Vita di Shanghai ha utilizzato FluorCam per misurare l'immagine di GFP ottenuta, in cui le piante che emettono colori brillanti sono le piante che esprimono GFP, più il loro colore è inclinato verso il rosso, indica che esprimono più GFP.

Analisi di imaging NDVI e GFP per contrazione del corallo a bottone - espansione in diverse fasi (T1 = 0, T2 = 30, T3 = 60) (Miguel, 2014)

Origine: Europa